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1標準添加法および内部標準法 D.Bax 版：ユトレヒト大学化学科 第 6 版（2001 年） ファイル：SAD01.DOC ～ SAD05.DOC
2目次 標準添加法 1. はじめに 1 2. マトリックス効果 2 3. 標準添加法とその限界 5 4. 標準添加法と火炎 AAS 8 5. 標準添加法と電気化学分析法 9 6. 標準添加法と分離メソッド（GC、HPLC） 9 7. 標準添加法による分析結果の誤差 標準添加法による計算例 標準添加法を使用した場合。いつ、そうでないとき? 13 内部標準法 1. はじめに 内部標準法の応用 内部標準法のコメント 内部標準を使用した検量線の例 19 ファイル: SAD01.DOC ～ SAD05.DOC
3標準添加法 1. はじめに 標準添加法は機器分析で広く使用されています。この方法の原理は単純です。しかし、多くの人は、この方法をいつ適用すべきか、そしておそらくもっと重要なのは、いつ適用すべきでないかを誤解しているようです。多くのユーザーは、「マトリックス効果」の意味を明確に理解していない、または効果が何から明らかになるのかを知らずに、「マトリックス効果」を修正していると述べています。間違っていますが、標準加算法は、ほとんどの教科書でただ単に議論されているだけです。多くの場合、校正溶液と校正曲線を使用した「通常の」方法でサンプルを分析することはできません。例: ガソリン中の鉛の AAS 測定中、ガソリンは火炎内の条件 (化学量論と温度) が標準水溶液が霧化されるときとは異なることを保証します。したがって、噴霧の程度はサンプル溶液と標準溶液で異なり、当然のことながら感度に影響を及ぼします。規格上、ガソリンと同じ組成の溶剤を作ることは不可能です。判定対象の部品の「環境」が解析結果に重要な影響を与える例です。この環境をマトリックスと呼び、説明される効果をマトリックス効果と呼びます。ほとんどの場合、サンプルと標準のマトリックスは異なります。つまり、マトリックス効果が存在します。多くの場合、解析結果に対するマトリックス効果の影響は重要ではありません。このような場合は、関連するマトリックス効果について話します。以下では、関連するマトリックス効果とは何か、またその修正方法について説明します。 1
42. マトリックス効果 分析化学では、式: シグナル = k 濃度 (1) ここで、k は検量線の傾き、または定義により、シグナルの感度です。分析。したがって、感度は濃度の変化に伴う信号の変化です。式では、感度 = ds/dc となります。この定義は、あらゆる形式の分析に適用されます。感度の概念を「検出限界」の概念と混同しないでください。これは定義が全く違いますし、次元も違います。サンプルと標準を分析する感度 (k) が同じでない場合、関連するマトリックス効果を扱うことになります。サンプル溶液の行列が (k によって) 測定対象の信号に影響を与えることが期待できる場合、測定対象のすべての溶液の行列が可能な限り等しいことを確認することで、この「行列効果」を補正できます。これは、いわゆる標準加算法によって実現されます。この方法は、次の 2 つの条件が満たされる場合にのみ適用できます。 I 信号と分析対象物の濃度の間に線形関係がなければなりません。 II 検体以外の成分は（独立して）信号に寄与しない可能性があります。 (これらの成分はもちろんマトリックスに寄与します。) 条件 II は次のように説明できます。赤色錯体 [Fe(CNS)] 2+ を分光光度法で測定する場合、溶液自体は他の色素によって赤色に着色されない可能性があります。分光光度計は、複合体による赤色と他の染料による赤色を自動的に区別することはできません。標準的な加算方法でもこれを修正することはできません。多くの場合、この 2 については別の方法で可能です
5修正する投稿の種類。この例では、干渉色素の消光を個別に測定できます。したがって、混合物の消光は、干渉色素の寄与によって補正することができます。最も単純な形式 (方法 A) では、標準的な添加方法では 2 つの溶液の測定のみが必要です。たとえば、測定する溶液は次のように構成できます。 1. 試料溶液 25.0 ml + 水 50.0 ml まで、 2. 試料溶液 25.0 ml + 標準水溶液 10.0 ml + 水 50.0 ml まで。両方のソリューションの行列はほぼ同じになりました。溶液 1 の濃度は C x と呼ばれ、溶液 2 の濃度は C x + δcs です。δcs は標準物質の添加による濃度の増加です。条件 I によれば、解 1 で得られた信号の場合: S x = k C x 、解 2 からの信号の場合: S t = k (C x + δcs )。これら 2 つの方程式から k を消去すると、次のようになります。 C x Sx = δ C s (2) (S S ) したがって、サンプル溶液中の濃度 (結局、1:1 に希釈したものです) は 2 C x になります。解 1 の C x の値はグラフで確認することもできます (図を参照)。 1. 分析対象物濃度 = 0 では信号も 0 に等しいという事実が利用されます。信号 = 0 に外挿することにより、C 軸のゼロ点が決定されます。 t×図1. 標準を 1 つ追加した校正ライン。この添加により、未知の濃度が約 2 倍になるはずです (方法 A)。方法 A の特性と制限については、3 を参照してください。単位はランダムに選択されます。 3
6標準添加方法の別の実施形態（方法Ｂ）は、上記の最も単純な方法と校正液を使用する方法とを組み合わせたものである。この場合、一連の測定溶液 (サンプル溶液 + 標準溶液) は、たとえば次のようになります。 1. サンプル溶液 25.0 ml + 水 (最大 100.0 ml)、 2. サンプル 25.0 ml + 標準水 5.0 ml + 水 (最大 100.0 ml) 100.0 ml、3. 25.0 ml サンプル + 10.0 ml 水性標準 + 水 100.0 ml まで、4. 25.0 ml サンプル + 15.0 ml 水性標準 + 水 100.0 ml まで、5. 25.0 ml サンプル + 20.0 ml 水性標準 + 水100.0mlまで。計算には線形最小二乗法が使用されるようになりました。これにより次の式が得られます。 S i = m δci + b (3) ここで、S i は溶液「i」からの信号、δci は標準溶液の添加による関連する濃度変化、m は傾きです。 b は S 軸との切片です。結果を図にグラフで示します。 2. 図2. 標準を複数追加したキャリブレーションライン。最大の添加により、未知の濃度が約 2 倍になるはずです (方法 B)。詳細と数値については、8 を参照してください。単位はランダムに選択されます。 4
7およそ、b は標準溶液が添加されていない溶液 (ここでは溶液 1) から得られるシグナルである S x に等しくなります。 S x と b はどちらも「正しい」値、つまり頻繁に測定を行った場合に見つかる値の近似値です。 b は複数の測定結果から得られるため、b は S x よりも「正しい」値の近似値が高くなります。溶液 1 の濃度 C x は次の式から求められます (図 2 も参照): C b m x = (4) したがって、サンプル溶液 (1:4 に希釈) の濃度は 4 C x になります。 3. 標準添加法の特性と限界 標準添加法は、分析物の濃度を近似する方法です。経験則として、標準添加法は、サンプルと標準の分析感度 (または検量線の傾き) である係数 k が次の条件を満たす場合にのみ、古典的な検量線よりも信頼できる結果をもたらします。それぞれ約 10% 以上異なると予想されます (例 4 ～ 6 を参照)。さらに、前述の条件 I および II を完全に満たす必要があります。標準加算法では検量線の外挿により解析結果が得られますが、古典検量線法では検量線の補間により解析結果が得られます。多くの場合、内挿は外挿よりも正確です。古典的な検量線が「正しい」ものであれば、より正確な分析結果が得られます。さらに、使用される校正線の部分の感度 (つまり、傾き) が小さすぎない限り、古典的な校正線の曲率に異論はありません。標準添加法では直線の検量線が必要です。もちろん、方法 A は方法 B より手間がかかりません。精度を高めるために、両方の濃度で複数の測定を実行することが望ましいです。方法 B は、C と S の間に線形関係があるという仮定 (条件 I に従って) に関するチェックを提供します。 b と S の間には (比較的) 大きな差があります x 5
8校正線が曲がっていることが原因で発生する可能性があります。次に、条件 I が依然として適用されるかどうかを検査する必要があります。条件 I (C と S の間の線形関係) が完全には満たされない場合がありますが、それでも標準的な加算方法を使用する必要があります。したがって、条件 I が完全に満たされていないことによる逸脱は、可能な限り制限される必要があります。これには次の 2 つの解決策があります。 1. 曲線検量線によって引き起こされる分析結果の偏差は、溶液中の濃度を可能な限り低く保つことによってある程度制限できます。検量線の曲率は通常、濃度が増加するにつれて増加します。希釈によりサンプルの濃度を可能な限り低くすることで、可能な限り真っ直ぐな検量線が得られます。マトリックス効果も軽減されます。検量線が下向きの曲率を示している場合、標準添加では高すぎる分析結果が得られます。 2. 仮定します: ここでの計算により、y = a 2 x 2 + a 1 x + a 0 について最良の検量線が得られます。低濃度では曲率がどの程度になるかわからないため、検量線から曲線を外挿することは決して許可されません。 。検量線の曲率は通常、濃度が増加するにつれて増加します。したがって、δc = 0 (または x = 0) での傾きを (計算またはグラフによって) 決定し、この切片から、見つかった傾きで曲線を S i = 0 (または y = 0) まで直線に外挿することができます。 x = 0 での傾きは a 1、外挿された直線の方程式は y = a 1 x + a 0 になります。x 軸との切片は x = -a 0 /a 1 になります。そこにある誤差について言えることは少ないです。この方法を図に示します。 3.6
9イチジク。 3. 曲線の検量線から直線を外挿すると、予想外に大きな誤差が生じます。ユニットはランダムに選択されます。サンプル溶液の体積が添加した標準溶液の体積に比べて（非常に）大きいことが確実であれば、サンプル溶液と標準溶液で十分です。その場合、一定の最終体積を得るために水を加える必要はありません。所望のδcを達成するには、標準溶液の濃度をサンプル溶液の濃度よりもはるかに高くする必要があります。この方法は、希釈の結果シグナルが小さくなりすぎる場合に特に重要です。上記のパラメータ C、S、m、b は無次元ではありません。 Ｃおよびδｃの共通の濃度単位、好ましくは［ｍｇ ｌ －１ ］を使用することが有用である。信号には任意だが簡単に測定できる単位を使用できますが、未知の濃度を計算する場合にはこれらの単位は省略されます。 C x は、C および δc と同じ単位で計算されるため、希釈の補正が簡単になります。計算に寸法を含めることが賢明です。これにより、エラーが防止されます。計算例を 8 に示します。式 (2) および (4) は、一連の添加からの溶液 1 (標準添加なし) の濃度を示します。原則として、サンプル溶液の濃度はこれからも計算する必要があります。 7
104. 標準的な添加方法と火炎ベイト 火炎ベイトには、ランバート ビールの法則が適用されます。 A= ε b c 火炎 (5) ここで、A = 消光、ε = 消光係数、b は火炎を通る光路の長さ、c は火炎です。炎内の分析対象原子の濃度。原則として、c 炎は溶液中の濃度の一定の割合であると仮定します。常にそうである必要はありません。火炎中の濃度と溶液中の濃度との関係は次のとおりです。 c 火炎 = f c 溶液 (6) ここで、f は溶液中の分析対象物の濃度と火炎中の分析対象物の濃度の比です。したがって、検量線の傾き k は次のようになります。 k = ε b f (7) 係数 f は、とりわけ、サンプルの吸収速度と噴霧器の効率に依存します。係数 f は、希薄水溶液および 1 つのデバイスの定数です。たとえば、多くの塩が溶解しているために検体溶液の粘度が標準溶液と異なる場合は、この限りではありません。 f の値も、非水溶液では水溶液とは異なります。経験則として、負荷度が 1 ～ 2% までの水溶液では、f は一定であると想定されます。ローディング度とは、水溶液中の非水成分の割合です。したがって、原則として、負荷率 (ウェル) を 1 ～ 2% 未満に保つことが推奨されます。 8
11AAS の校正線が完全に真っ直ぐになるのは、例外的な場合のみです。したがって、必要なしに標準の加算方法を適用すると、重大なエラーが発生します。 AAS による校正線の曲率は、ほとんどの場合下向きです。この場合、標準加算法で分析すると過大な結果が得られます。 5. 標準添加法および電気化学分析法 ポーラログラフィーでは、検体の濃度に比例するいわゆる限界電流が存在するという事実を利用します (I 限界 = k 濃度)。比例係数 k (検量線の傾き) は、とりわけ、分析対象の溶液中の分析物の拡散係数に依存します。この拡散係数は一般に、組成が異なる溶液では同じではありません。この場合、原則として常に標準加算方法を使用する必要があります。実際にこれがどの程度必要かは、分析するサンプルの性質に大きく依存します。疑問がある場合には、検量線と標準添加検量線の傾きを実験的に求めて比較することができます。差が約 10% より小さい場合 (3. を参照)、検量線法が優先されます。電量分析は絶対的な分析方法であり、通過した電荷 Q と変換された物質の量 m の関係は、ファラデーの法則によって正確にわかります。この場合、検量線は必要ないため、標準添加方法を使用する必要はありません。 6. 標準的な添加および分離方法 分離方法 (GC および HPLC) では、分析対象物がマトリックスから分離されます。したがって、検量線の傾きはマトリックスの影響を受けることはありません。したがって、標準の追加方法は決して使用しないでください。 9
127. 標準加算法による分析結果の誤差 検量線の傾き m に誤差があると、測定値の重心から C x を測定するほど、分析結果 C x の絶対誤差が大きくなります。 。イチジク。 11 ページの 5 は、その極端な例を示しています。 S 軸との切片の絶対誤差 b は、測定値の重心までの距離には依存しません。 b の相対誤差は、b が小さいほど明らかに増加します (図 4)。実際には、次のことを行うと良好な精度が得られるようです。方法 A では、添加により濃度が約 2 倍になります。例えば、方法 B では、標準溶液を添加した溶液は、標準溶液を添加していない溶液の 130、160、190、220% を含む必要があります。したがって、添加量は、未知の濃度と比較して小さすぎても (約 30% 未満)、多すぎても (約 100% を大幅に超える) ことはできません。これは、測定される濃度の推定が可能な場合にのみ標準添加が成功できることを意味します。大きすぎる影響や、小さすぎる追加は図に示されています。 4 と 5 (p. 11) に図示されています。イチジク。 1 と 2 (3 ページと 4 ページ) は正しい追加を示しています。解析結果（C軸との交点）の誤差は、線形最小二乗法による検量線の計算に起因します。この方法は文献で広く説明されています。計算例は8と9で計算されます。 10
13イチジク。方法Ｂによる標準添加法の検量線； ４．加算が大きすぎる (傾き m の誤差は小さいが、切片 b の相対誤差が大きい)。ユニットはランダムに選択されます。イチジク。方法Ｂによる標準添加法による校正、 ６．加算が小さすぎる (切片 b の誤差は小さいが、傾き m の誤差は大きい)。ユニットはランダムに選択されます。 11
148. 標準添加法による計算例 2.（4 ページ）に記載の測定シリーズでは、20 mg l-1 の標準を使用し、この方法で計算したδc の値を記載しています。分析、測定結果（Ｓ）は表１から得た。添加濃度 (δc) [mg l -1 ] 得られた信号 (S) 例: [cm] これらの結果は図にもグラフ化されています。 2. 線形最小二乗法を使用した計算により、検量線の式は S = 1.07 δc + 4.10 であることがわかります。したがって、検量線の傾きは m = 1.07 [cm l mg -1 ]、S 軸との交点は b = 4.10 [cm] になります。溶液 1 の濃度は 4.10/1.07 = 3.83 mg l -1 です。したがって、サンプル溶液 (1:4 に希釈) には 4 x 3.83 = 15.3 mg l -1 が含まれます。線形最小二乗法による計算 (9. を参照) も、溶液 1 とサンプル溶液の濃度がそれぞれ 95% の確率で一致することを示しています。 3.2～4.5および12.6～18.0 mg l
159. 標準添加方法をいつ使用するのか、いつ使用しないのか?例 標準的な添加方法 ある自治体には、カドミウム層を備えた金属物体を提供する会社があった土地があります。かつては人々の環境意識があまり高くなかったため、この場所はカドミウムやその他の金属で汚染されていた可能性があります。自治体はその土地を住宅として使用したいと考えているため、改修が必要かどうかを調査する必要があります。修復費用は約ユーロになります。自治体は十分な根拠に基づいた決定を下すために分析機関を雇っている。分析機関は区画を調査し、地下水のサンプルを採取することを決定します。これらのサンプルは AAS で分析され、カドミウムおよびその他の金属の含有量が測定されます。ここで、サンプルを古典的な検量線を使用して測定するか、標準添加法を使用して測定するかを決定する必要があります。標準的な追加方法を使用すると、作業量が約 2 倍になるため、コストが大幅に高くなります。組織再編に伴う金額を考えると、分析手法の選択には、合理的な根拠に基づいて決定を下すことが非常に重要です。もちろん、必要または希望に応じて、分析機関は決定を裏付けるために予備測定を行うことができます。可能な分析方法が AAS のみである場合、分析機関のプロジェクト リーダーまたは従業員として、どのような方法に従いますか? 13
16回答: 標準の加算方法を使用する場合とそうでない場合を教えてください。例 答えは、分析測定が実行される感度によって異なります。したがって、ここではその定義を示します。分析法の感度 G は、濃度 c による信号 S の変化であり、式: G = ds/dc です。グラフで見ると、測定の感度は検量線の傾きに等しくなります。分析測定の感度の概念は、使用される分析法の性質には依存しません。注意: 感度と検出限界は 2 つのまったく異なる概念です。寸法も不均一です。標準とサンプルの分析感度が同じであれば、古典的な検量線を使用して測定を実行できます。これがどの程度当てはまるのかを検討する必要がある。すべてのサンプルは 1 つの土地から採取されました。それらはすべて地下水で構成されており、それらの測定感度はほぼ同じであると想定できます。注も参照してください。もちろん、濃度はサンプルごとに異なります。したがって、サンプルから代表的なサンプル、たとえば 50 個を抽出します。それらを測定できる感度を決定します。これは標準の追加方法でのみ可能です。また、どの程度の感度で標準を測定できるかも決定します。これは、古典的な検量線を含めることによって実行できます。次に、サンプルの測定時の平均感度と標準の測定時の感度を比較します。標準加算法自体は誤差を伴う近似法であるため、約 10% 未満の差は標準加算法を使用する理由にはなりません。差が約 10% を超える場合は、後者の方法を使用する必要があります。注: 50 個のサンプルの測定感度に 10% を超える変動があることが判明した場合は、すべてのサンプルを標準加算法を使用して測定する必要があります。どの感度の広がりまたは感度の差が許容されるか (ここでは例として両方 10%) は、求められる達成可能な測定精度 (上限) と、近似方法として標準加算を使用することによって導入される誤差によって決まります。 （ 下限）。これに厳密な制限を与えることはできません。標準添加法の誤差は、個々の点の品質 (重複の広がり、これが重み係数を提供します)、検量線の直線性と相関係数、および未知の濃度に関連した添加量のサイズに依存します。 。ポイントの重み係数が等しい場合、POWERFIT プログラムはこの誤差の適切な近似値を提供します。注意: 検量線の相関係数は、その直線性 (直線性) については何も示しません。 14
17内部標準法 標準添加法 1. はじめに 標準添加法では、サンプルの「逸脱」挙動を補正します。場合によっては、機器の効果や分析者によって引き起こされた効果を補正することも必要です。そんなときに役立つのが「内部標準法」です。扱う効果が全く異なるため、標準加算法とは異なる記号が使用されます。分析化学では、ほぼすべての方法で、シグナルは濃度に正比例します。式: S 1 = p 1 C 1 (1) ここで、S 1 は信号、C 1 は濃度、p 1 は比例係数です。ある物質について特定の濃度で p 1 が一定である場合、「通常の」検量線を作成し、その検量線を使用して未知の濃度を決定するだけで十分です。測定されたサンプル量が一定でない場合や検出器の応答が遅い場合など、p 1 が一定でない場合があります。そんなときは「内部標準法」が解決します。ガスクロマトグラフィーの注射に使用されるようなシリンジは、実際にはかなり原始的な器具です。 μl の容量のこのようなシリンジでは、「ピストン」（プランジャー）はチューブ（ガラスまたはステンレス鋼の注射針）内で上下に移動できるワイヤーで構成されています。このようなシリンジでは、プランジャーに沿った漏れを完全に防ぐことはできません。漏れの程度は、とりわけ、プランジャーが押される速度に依存します。さらに、注入されたサンプルに気泡が含まれるのを防ぐことは困難です。サンプルは目に見えないため、気泡の存在を確認することは多くの場合不可能です。結論: このタイプのシリンジで注入される量は完全に再現可能ではありません。 15
18最も一般的に使用されるガスクロマトグラフィー検出器 (FID およびカタロメーター) は、非常に一定した検出器応答を提供します。電子捕獲検出器 (ECD) の応答が遅くなる (ドリフト) 可能性があります。この進行は、内部標準法の p の適用の値に影響します。ガスクロマトグラフィーでは、p 1 は注入量 V と検出器応答 D 1 の関数であり、p は比例係数です。したがって、検体の p 1 については、次のように書くことができます。 p 1 = p V D 1 (2) V および D 1 の変動の補正は、「内部標準法」を使用することで簡単に得られます。内部標準法では、既知量のいわゆる「内部標準」がサンプルに追加されます。内部標準の量は分析物の量とほぼ同じである必要があります。内部標準は、分析物と内部標準の保持時間がクロマトグラム内で重複せずに可能な限り一致するように選択されることが好ましい。内部標準はすべてのサンプル処理を受け、同じ方法で注入され、同じ条件でクロマトグラフ処理されます。損失、注入量の変動、カラムの温度、検出器信号のゆっくりとした減衰は、分析対象物のピークと内部標準のピークに同様に影響を与えます。したがって、内部標準は 16 にも同様に適用されます。
19方程式 (1) および (2): そして: S 2 = p 2 C 2 (3) p 2 = p V D 2 (4) 比 S 1 /S 2 については、次のことが成立します: S S 1 2 p = p C C (5) p 1 と p 2 について式 (2) と (4) を完成させると次の結果が得られます: S S 1 2 p V D1 C1 = p V D2 C2 (6) D 1 /D 2 が一定である限り、式 (6) は次のようになります。 : S S 1 2 p C * = C 1 2 (7) ここで、p * = D 1 /D 2 は注入量に依存しません。線形の検出器応答 1 または検出器応答に緩やかな勾配があるという条件が満たされる場合 (つまり、1 つのクロマトグラム中、検出器応答は一定でなければなりません)、D 1 /D 2 も検出器応答から独立しています。応答の急激な変動により、D 1 /D 2 が不一致になります。この場合、内部標準法は機能しません。 1 線形検出器応答は、検出器信号とサンプル サイズの関係が正比例する場合に発生します。過充電された検出器では、検出器の線形応答はありません。 17
20内部標準法では、S 1 /S 2 が C 1 /C 2 に対してプロットされます。このようにして得られた線は検量線として使用できます (図 1)。未知のサンプルを決定する場合、S 1 /S 2 が決定されます。これにより、C 1 /C 2 の値が得られます。C 2 は既知であるため、C 1 を計算できます。注意: C 2 がサンプルと標準で同じである場合、C 2 を知る必要はありません。 S1/S2図1. 内部標準メソッド C 1 /C 2 の検量線 3. 内部標準メソッドに関するコメント。検出の遅れや注入量の変動を想定する理由がない場合、内部標準法を使用する理由もありません。 HPLC は「注入ループ」を使用します。これは正確に既知の体積を備えた毛細管で、クロマトグラフィー カラムへの供給ラインに含めることができます。これにより、非常に一定の注入量が保証されます。 HPLC の検出器 (多くの場合、UV 分光光度計) は、ウォームアップ時間の後、速度の低下をほとんど示しません。この場合、社内標準法では改善が見られません。内部標準は、検体が後処理手順中に失われるかどうか、たとえば抽出によるものなのか、濾過中の損失によるものなのかが不確実な場合にも使用できます。内部標準は分析物とまったく同じ操作を受けます。内部標準の特定の割合が失われた場合、同じ割合の分析対象物が失われたと想定されます。要約: 18
21たとえばガスクロマトグラフィーにおける内部標準法の利点は次のとおりです。 1. この方法は、検出器の応答の遅い変化の影響を受けません。 1 つのクロマトグラム中、検出器の応答は一定でなければなりません。 2. 注入量は重要ではないため、正確に測定する必要はありません。 3. 内部標準を添加すると、溶媒の流出や蒸発によって定量結果が変化することはなくなります。 4. 内部標準を使用した検量線の例 内部標準を使用した検量線の一連の溶液は次のようになります。 1. 1.00 ml 標準溶液 + 1.00 ml 内部標準 + 溶媒を 25.00 ml にする 2. 2.00 ml 標準溶液 + 1.00 ml 内部標準 + 溶媒 25.00 ml まで 3. 3.00 ml 標準液 + 1.00 ml 内部標準 + 溶媒 25.00 ml まで 4. 4.00 ml 標準液 + 1.00 ml 内部標準 + 溶媒 25.00 ml まで 5. 5.00 ml 標準液 +内部標準 1.00 ml + 溶媒 25.00 ml まで 標準溶液 0 ml の溶液も当然このシリーズに属します。この解では、C 1 /C 2 =0 および S 1 = 0 となり、検量線内の点 (0,0) が生成されます。この点は測定する必要はありません。 C 1 = 標準の濃度、C 2 = 内部標準の濃度、S 1 = 標準のシグナル、および S 2 = 内部標準のシグナル。検量線を測定すると、すべての点の S 1、S 2、C 1、および C 2 がわかり、図 1 に従って検量線を作成できます。サンプル溶液は次のようになります: 5.00 ml サンプル溶液 + 1.00 ml 内部標準 + 溶媒で 25.00 ml。サンプル溶液を測定すると、S 1 、S 2 、および C 2 が分かるため、検量線を使用して C 1 を計算できます。 19
